玉米葉綠素含量的快速測定

      葉綠素是植物葉片光合作用的主要光合色素，必不可少。葉綠素含量的測定是實驗室的重要項目之一，如采用化學方法Arnon法，分光光度計法，葉綠素含量測定儀等，不一而足。迄今為止，在實際應用中，我們通常采用葉綠素含量測定儀，因為其方便快捷，而且精確度高，方便攜帶。受到廣泛農業工作者、科研院所的青睞。
      分光光度計法測定結果準確可靠，但是在測定時需要損傷葉片和組織，不利于對植株的系統研究。葉色值反映了植物葉片的綠色程度，與葉綠素含量存在一定的相關性。葉綠素含量測定儀是一種專門用于測定植物葉綠素含量的儀器，該儀器有多家廠商生產銷售，其中以日本柯尼卡美能達公司的SPAD-502最為高端和暢銷。托普儀器作為日本柯尼卡美能達公司的特約一級代理商，也提供葉綠素含量測定儀的銷售工作。葉綠素測量儀的測定原理是：測量葉子在紅色區域和近紅外區域的吸收率。通過這兩部分區域的吸收率，來計算出一種SPAD值，它是用數字來表示目前和葉子中葉綠素含量相對應的參數。因為葉綠素在藍色區域（400—500nm）和紅色區域（600—700nm）范圍內吸收達到了峰值，但在近紅外區域卻沒有吸收。另外，葉綠素含量測定儀還具有反應氮元素含量的作用。
      玉米葉綠素含量的測定有兩種方法。葉綠素含量測定儀法：利用日本產的SPAD-502葉綠素含量測定儀于花期對玉米功能葉片中部進行活體測定。每個材料取3個葉片，最后求平均值。分光光度計法：將葉綠素含量測定儀法測定完的葉片取回進行分光光度計法測定。用毛刷刷去表面雜質，用水沖洗，擦干，備用。每個葉片在中部用直徑9 mm打孔器打孔，取6個圓形葉片，稱重后放于15 mL試管，用10 mL95%乙醇避光浸泡96 h，浸泡過程中每天混勻2次，葉片完全變白后進行比色，于665、649、470 nm波長測量光密度值，計算葉綠素含量，取3個葉片的平均值作為該材料的含量值。計算公式為：CA=13.95D665-6.88D649；CB=24.96D649-7.32D665；C其它=(1000D470-2.05CA-114.8CB)/245。